如何使用蛋白質測定儀檢測豆漿蛋白質?
來源: http://www.yoshikomatsuura.com/ 類別:實用技術 更新時間:2020-03-25 閱讀次
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蛋白質與生命的起源、存在和進化都密切相關。蛋白質測定涉及到生產和科研的諸多領域。如今,比較常用的測定方法還屬凱氏定氮法,用到的儀器就是我們今天要講的ZDDN-II蛋白質測定儀,該方法是適用范圍最廣測定結果最準確的方法。
蛋白質測定儀能檢測食品、糧食、飲料、飼料中的蛋白質含量。以豆漿檢測為例,蛋白質測定步驟如下:
一、樣品消化
量取豆漿約15ml,移入干燥的100mL凱氏燒瓶中,加入0.2g硫酸銅和6g硫酸鉀,稍搖勻后瓶口放一小漏斗,加入20mL濃硫酸,將瓶以450角斜支于有小孔的石棉網上,使用萬用電爐,開始時用低溫加熱,待內容物全部炭化,泡沫停止后,再升高溫度保持微沸,消化至液體呈藍綠色澄清透明后,繼續加熱0.5h,取下放冷,小心加20mL水,放冷后,無損地轉移到100mL容量瓶中,加水定容至刻度,混勻備用,即為消化液。
二、蒸餾吸收
蒸餾和吸收是在蛋白質測定儀(凱氏定氮儀)內進行的。凱氏定氮蒸餾裝置種類甚多,大體上都由蒸氣發生、氨的蒸餾和氨的吸收三部分組成。
三、滴定
樣品和空白蒸餾完畢后,一起進行滴定。打開接受瓶蓋,用酸式微量滴定管以0.0100mol/L的標準鹽酸溶液進行滴定。待滴至瓶內溶液呈暗灰色時,用蒸餾水將錐形瓶內壁四周淋洗一次。若振搖后復現綠色,應再小心滴入標準鹽酸溶液半滴,振搖觀察瓶內溶液顏色變化,暗灰色在一二分鐘內不變,當視為到達滴定終點。
若呈粉紅色,表明已超越滴定終點,可在已滴定耗用的標準鹽酸溶液用量中減去0.02mL,每組樣品的定氮終點顏色必須完全一致。空白對照液接受瓶內的溶液顏色不變或略有變化尚未出現綠色,可以不滴定。記錄每次滴定耗用標準鹽酸溶液毫升數,供計算用。
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