葉綠素測(cè)定儀研究棗樹(shù)品種試管苗葉綠素含量的變化
來(lái)源： http://www.yoshikomatsuura.com/ 類別：實(shí)用技術(shù) 更新時(shí)間：2013-01-18 閱讀次
【本資訊由中國(guó)糧油儀器網(wǎng)提供】 試管苗與正常的栽培苗有什么區(qū)別呢？我們要從對(duì)其影響很大的葉綠素研究，借用葉綠素測(cè)定儀，我們研究分析一下棗樹(shù)品種試管苗葉綠素含量的變化，以下是操作步驟和結(jié)果。
葉綠素是與光合作用有關(guān)的最重要的色素。葉綠素不溶于水，但能溶于酒精、丙酮等有機(jī)溶劑。葉綠素測(cè)定儀是根據(jù)植物的葉綠素對(duì)光線吸收的高峰主要集中在紅光區(qū)和藍(lán)光區(qū)、而對(duì)綠光區(qū)和紅外光區(qū)很少吸收的特性制作而成。它可以通過(guò)植物的“綠色度”來(lái)判別植物葉片葉綠素的相對(duì)含量，從而可以了解植物真實(shí)的硝基需求量，并可幫助了解土壤硝基的缺乏程度，判斷是否過(guò)多地施加了氮肥。棗樹(shù)組織培養(yǎng)苗在增殖階段一般采用MS全鹽培養(yǎng)基，而在生根過(guò)程中采用1／2MS或者H培養(yǎng)基，這兩種培養(yǎng)基的硝酸鹽含量均較低；而陜北地區(qū)的黃綿土中硝基含量更是比培養(yǎng)基中的還低。棗樹(shù)試管苗生根后一般經(jīng)過(guò)煉苗后移栽才能先進(jìn)入大棚，再轉(zhuǎn)入大田。大田苗的枝條可直接經(jīng)扦插進(jìn)入大田。兩者之間有著很大的差異。本文通過(guò)對(duì)棗樹(shù)組培苗（繼代和生根）葉綠素和大田苗葉綠素含量的差異研究，以期為研究棗樹(shù)人工繁育和自然繁育對(duì)棗樹(shù)生活能力的差異影響提供依據(jù)。
試驗(yàn)所用的棗樹(shù)品種分別是狗頭棗、木棗、晉棗，各品種的試管苗葉片取自陜西省區(qū)域生物資源保育與利用工程技術(shù)研究中心的組培與育種實(shí)驗(yàn)室；各品種的大田苗葉片取自陜西省區(qū)域生物資源保育與利用工程技術(shù)研究中心的苗木品種示范園成年株。分別隨機(jī)選取在MS培養(yǎng)基中生長(zhǎng)了25d的狗頭棗、木棗、晉棗試管繼代苗葉片和在1／2MS培養(yǎng)基中培養(yǎng)了25d的生根苗葉片各50片；在示范園中選取同一棗吊相對(duì)位置接近的狗頭棗、木棗、晉棗葉片各50片。每張葉片隨機(jī)選取6個(gè)點(diǎn)，用葉綠素測(cè)定儀測(cè)量葉綠素的相對(duì)含量。試管苗的測(cè)量在室內(nèi)日光燈開(kāi)啟前，大田苗的測(cè)量在早晨日出前進(jìn)行。活體測(cè)量完后的葉片用丙酮－乙醇提取法測(cè)量其總?cè)~綠素含量。數(shù)據(jù)處理依據(jù)統(tǒng)計(jì)學(xué)原理，用Excel2003軟件進(jìn)行分析。
采用兩種方法對(duì)棗樹(shù)葉綠素的含量進(jìn)行了測(cè)定，其中丙酮－乙醇提取法已有不少研究者使用過(guò)，如李保國(guó)等對(duì)灰棗等10個(gè)棗樹(shù)品種的葉綠素含量做了測(cè)定，結(jié)果表明，所測(cè)棗樹(shù)的葉綠素含量在2.52～4.43mg•g-1之間。葛曉霞等對(duì)駿棗脫毒苗葉綠素的含量做了研究，發(fā)現(xiàn)脫毒苗葉綠素的含量大于原種苗的。梁建萍等對(duì)脅迫條件下棗樹(shù)的葉綠素含量進(jìn)行了測(cè)定。徐偉紅等對(duì)棗樹(shù)葉綠素的熒光參數(shù)日變化做了探討。楊敏文對(duì)葉綠素測(cè)定的不同方法做了研究，認(rèn)為丙酮－乙醇提取法速度快，葉綠素得率高，穩(wěn)定性好，精密度高。艾天成等用葉綠素測(cè)定儀法對(duì)小麥的葉綠素含量做了研究，認(rèn)為該方法快速準(zhǔn)確穩(wěn)定性好。但是，葉綠素測(cè)定儀法在棗樹(shù)上的應(yīng)用尚屬首次。
棗樹(shù)葉綠素含量變化3個(gè)棗樹(shù)品種從試管繼代苗到大田苗均出現(xiàn)葉綠素含量從低到高的變化。而且在大田苗中表現(xiàn)為木棗、晉棗用兩種方法測(cè)量的葉綠素含量均大于狗頭棗的現(xiàn)象。該現(xiàn)象可能與這3個(gè)品種棗樹(shù)的適應(yīng)性有關(guān)，晉棗、木棗在陜西、山西等地均有分布，而狗頭棗僅在陜西延川一帶有少量分布。從試管苗到大田苗，棗樹(shù)由營(yíng)養(yǎng)異養(yǎng)型轉(zhuǎn)變?yōu)闋I(yíng)養(yǎng)自養(yǎng)型，而自養(yǎng)條件下葉綠素的含量高于異養(yǎng)的，在這一過(guò)程中，培養(yǎng)基中銨態(tài)氮和硝態(tài)氮的含量降低、綠素含量升高這一現(xiàn)象有待進(jìn)一步研究。進(jìn)行試管苗葉綠素含量的研究成果，葉綠素測(cè)定儀功不可沒(méi)，現(xiàn)在這類儀器在進(jìn)行科研時(shí)候，應(yīng)用起來(lái)特別的方法，比如說(shuō)測(cè)量脂肪含量的脂肪測(cè)定儀，和測(cè)量葉綠素的儀器一樣，都是傻瓜式操作，直接按鈕就可以，極大的提高了研究速度。
葉綠素是與光合作用有關(guān)的最重要的色素。葉綠素不溶于水，但能溶于酒精、丙酮等有機(jī)溶劑。葉綠素測(cè)定儀是根據(jù)植物的葉綠素對(duì)光線吸收的高峰主要集中在紅光區(qū)和藍(lán)光區(qū)、而對(duì)綠光區(qū)和紅外光區(qū)很少吸收的特性制作而成。它可以通過(guò)植物的“綠色度”來(lái)判別植物葉片葉綠素的相對(duì)含量，從而可以了解植物真實(shí)的硝基需求量，并可幫助了解土壤硝基的缺乏程度，判斷是否過(guò)多地施加了氮肥。棗樹(shù)組織培養(yǎng)苗在增殖階段一般采用MS全鹽培養(yǎng)基，而在生根過(guò)程中采用1／2MS或者H培養(yǎng)基，這兩種培養(yǎng)基的硝酸鹽含量均較低；而陜北地區(qū)的黃綿土中硝基含量更是比培養(yǎng)基中的還低。棗樹(shù)試管苗生根后一般經(jīng)過(guò)煉苗后移栽才能先進(jìn)入大棚，再轉(zhuǎn)入大田。大田苗的枝條可直接經(jīng)扦插進(jìn)入大田。兩者之間有著很大的差異。本文通過(guò)對(duì)棗樹(shù)組培苗（繼代和生根）葉綠素和大田苗葉綠素含量的差異研究，以期為研究棗樹(shù)人工繁育和自然繁育對(duì)棗樹(shù)生活能力的差異影響提供依據(jù)。
試驗(yàn)所用的棗樹(shù)品種分別是狗頭棗、木棗、晉棗，各品種的試管苗葉片取自陜西省區(qū)域生物資源保育與利用工程技術(shù)研究中心的組培與育種實(shí)驗(yàn)室；各品種的大田苗葉片取自陜西省區(qū)域生物資源保育與利用工程技術(shù)研究中心的苗木品種示范園成年株。分別隨機(jī)選取在MS培養(yǎng)基中生長(zhǎng)了25d的狗頭棗、木棗、晉棗試管繼代苗葉片和在1／2MS培養(yǎng)基中培養(yǎng)了25d的生根苗葉片各50片；在示范園中選取同一棗吊相對(duì)位置接近的狗頭棗、木棗、晉棗葉片各50片。每張葉片隨機(jī)選取6個(gè)點(diǎn)，用葉綠素測(cè)定儀測(cè)量葉綠素的相對(duì)含量。試管苗的測(cè)量在室內(nèi)日光燈開(kāi)啟前，大田苗的測(cè)量在早晨日出前進(jìn)行。活體測(cè)量完后的葉片用丙酮－乙醇提取法測(cè)量其總?cè)~綠素含量。數(shù)據(jù)處理依據(jù)統(tǒng)計(jì)學(xué)原理，用Excel2003軟件進(jìn)行分析。
采用兩種方法對(duì)棗樹(shù)葉綠素的含量進(jìn)行了測(cè)定，其中丙酮－乙醇提取法已有不少研究者使用過(guò)，如李保國(guó)等對(duì)灰棗等10個(gè)棗樹(shù)品種的葉綠素含量做了測(cè)定，結(jié)果表明，所測(cè)棗樹(shù)的葉綠素含量在2.52～4.43mg•g-1之間。葛曉霞等對(duì)駿棗脫毒苗葉綠素的含量做了研究，發(fā)現(xiàn)脫毒苗葉綠素的含量大于原種苗的。梁建萍等對(duì)脅迫條件下棗樹(shù)的葉綠素含量進(jìn)行了測(cè)定。徐偉紅等對(duì)棗樹(shù)葉綠素的熒光參數(shù)日變化做了探討。楊敏文對(duì)葉綠素測(cè)定的不同方法做了研究，認(rèn)為丙酮－乙醇提取法速度快，葉綠素得率高，穩(wěn)定性好，精密度高。艾天成等用葉綠素測(cè)定儀法對(duì)小麥的葉綠素含量做了研究，認(rèn)為該方法快速準(zhǔn)確穩(wěn)定性好。但是，葉綠素測(cè)定儀法在棗樹(shù)上的應(yīng)用尚屬首次。
棗樹(shù)葉綠素含量變化3個(gè)棗樹(shù)品種從試管繼代苗到大田苗均出現(xiàn)葉綠素含量從低到高的變化。而且在大田苗中表現(xiàn)為木棗、晉棗用兩種方法測(cè)量的葉綠素含量均大于狗頭棗的現(xiàn)象。該現(xiàn)象可能與這3個(gè)品種棗樹(shù)的適應(yīng)性有關(guān)，晉棗、木棗在陜西、山西等地均有分布，而狗頭棗僅在陜西延川一帶有少量分布。從試管苗到大田苗，棗樹(shù)由營(yíng)養(yǎng)異養(yǎng)型轉(zhuǎn)變?yōu)闋I(yíng)養(yǎng)自養(yǎng)型，而自養(yǎng)條件下葉綠素的含量高于異養(yǎng)的，在這一過(guò)程中，培養(yǎng)基中銨態(tài)氮和硝態(tài)氮的含量降低、綠素含量升高這一現(xiàn)象有待進(jìn)一步研究。進(jìn)行試管苗葉綠素含量的研究成果，葉綠素測(cè)定儀功不可沒(méi)，現(xiàn)在這類儀器在進(jìn)行科研時(shí)候，應(yīng)用起來(lái)特別的方法，比如說(shuō)測(cè)量脂肪含量的脂肪測(cè)定儀，和測(cè)量葉綠素的儀器一樣，都是傻瓜式操作，直接按鈕就可以，極大的提高了研究速度。
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